质粒载体网H9 胚胎干细胞（有滋养层）

细胞名称：H9

细胞描述：人类胚胎干细胞，曾用名 WA09

物种：人，女性组织：内细胞团

细胞来源：2006 年引进

完全培养液：hES 完全培养液（目录号：SCSP-613）。配方见备注批次/冻存日期：详见 冻存管/培养瓶 标识

参考传代周期：7  天参考传代比例：1:2-1:4 参考换液频率：每天

2×冻存液：hES 完全培养基 20%，FBS 60%，DMSO 20%。或使用 hES 专用冻存液（目录号：SCSP-668） 进行冻存

细胞形态：克隆状生长，需使用 CF-1 MEF（SCSP-105R）作为饲养层细胞支原体检测结果：阴性

运输和保存：干冰运输，1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

STR 鉴定结果：

Amelogenin: X D5S818: 11,12

D13S317: 9

D7S820: 9,11

D16S539: 12,13

vWA: 17

THO1: 9

TPOX: 10,11

CSF1PO: 11

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。                      

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。